1、 组织中氯霉素快速检测卡检测原理
氯霉素快速检测卡应用了竞争抑制免疫层析的原理,样本中的氯霉素在流动的过程中与胶体金标记的特异性单克隆抗体结合,抑制了抗体和NC膜检测线上氯霉素-BSA偶联物的结合。如果样本中氯霉素含量大于0.2μg/L,检测线不显颜色或颜色较浅,结果为阳性;反之,检测线显红色,结果为阴性。
2、 组织中氯霉素快速检测卡产品组成
快速检测卡(20个),说明书,样品缓冲液,一次性塑料吸管(20支); 一次性塑料手套(5只)。
3、 组织中氯霉素快速检测卡样品处理
3.1 实验室方法
⑴取5 g 已搅碎的待测样品于50 mL离心管中。
⑵加入10 mL乙酸乙酯,震荡混合均匀后再上下颠倒混合10分钟
⑶离心10分钟(1700 x g 或3000 rpm),取6 mL上层液(乙酸乙酯)至10 mL玻璃管中,于50 ℃下,利用氮气将溶剂吹干。
⑷加入300 µL样品缓冲液及1 mL正己烷回溶,震荡混合1分钟
⑸离心10分钟(1700 x g 或3000 rpm),弃去上层正己烷后留下层液体待检(若下层液浑浊可用80℃热水加热5至10分钟即可改善)
3.2 现场方法
⑴取5 g 已搅碎的待测样品于50 mL离心管中。
⑵加入10 mL乙酸乙酯,震荡混合均匀后再上下颠倒混合10分钟
⑶取少量脱脂棉放入漏斗底部,将上述处理样本倒入漏斗,过滤并收集滤液。取6 mL上层液(乙酸乙酯)至10 mL玻璃管中,于60 ℃下,利用样本浓缩仪将溶剂吹干。
⑷加入300 µL样品缓冲液及1 mL正己烷回溶,震荡混合1分钟
⑸掌式离心机离心10分钟,弃去上层正己烷后留下层液体待检(若下层液浑浊可用80℃热水加热5至10分钟即可改善)
4、 组织中氯霉素快速检测卡操作步骤以及结果判读:
⑴测试前将未开封的检测卡及待检样品溶液恢复至室温。
⑵从原包装铝箔袋中取出检测卡,在半小时内使用。
⑶将检测卡平放,用塑料吸管垂直滴加4滴无气泡样本(约120μL)于加样孔。
⑷反应7分钟后判断结果(请勿超过15分钟判读,以免因时间因素而干扰判读结果):
阴性结果 : T线比C线深,或一样深,表示样品氯霉素浓度低于其灵敏度。
阳性结果 : T线比C线淡,表示样品氯霉素浓度高于其灵敏度。
无效反应: 如果测试结果C线未出现,表示此试剂已失效。
5、 组织中氯霉素快速检测卡储存及有效期:
原包装在4-30℃阴凉避光干燥处储存,有效期为12个月,生产日期及有效期见包装盒。
6、 组织中氯霉素快速检测卡注意事项:
⑴样品处理步骤3中,一般情况下离心后能取到6ml上层液,如遇特殊样品上层液不足6ml,尽量将上层液都取出 (步骤4中,样品缓冲液加入量也作相应改变 V缓冲液=V上层液/20 )。
⑵检测卡在室温下一次性使用,请勿重复使用。
⑶操作时请勿触摸试纸显示区,检测时避免阳光直射及风扇直吹。
⑷若出现阳性结果,建议用本卡复查一次。